ХРОМАТОГРАФИЯ
(от греч,
chroma,
род. надеж chromatos — краска,
цвет и grapho — пишу),
физико-химия,
метод разделения смесей,
близких по составу и свойствам,
основанный на распределении их компонентов между двумя фазами — неподвижной и подвижной,
протекающей через неподвижную. При X. вещества берутся в малых кол-вах (десятые доли миллиграмма),
не подвергаются в процессе анализа химич. изменениям. В биол.
исследованиях X. применяют,
напр.,
для выделения из сложных смесей белков,
в т. ч. ферментов,
витаминов,
гормонов и др. биологически активных веществ,
канцерогенных веществ,
пигментов; в фармацевтич. пром-сти — для получения чистых препаратов.
В зависимости от механизма разделения различают след. виды X.: адсорбционную,
распределительную,
ионообменную,
осадочную,
окислительно-восстановительную,
адсорбциошю-комплексообразоватсльную,
аффинную. Адсорбционная X. основана на избирательной адсорбции отдельных компонентов смеси при её [ее] пропускании через колонку,
заполненную соответств. адсорбентом (окись алюминия,
силикагель,
крахмал и Др.). Распределительная X. основана на различном распределении компонентов смеси между двумя несмешивающимися жидкостями,
одна из к-рых (неподвижная) находится в порах твёрдого [твердого] носителя,
а вторую (подвижную) пропускают через колонку с носителем. С помощью этого вида X.
разделяют жирные к ты содержимого рубца. В основе ионообменной X.
лежат обменные процессы между подвижными ионами адсорбента (ионита) и ионами (катионами и анионами) электролита,
содержащимися в анализируемом р-ре. Этот вид X. используют для определения связанного с белками кальция в сыворотке крови,
выделения мн. ферментов и др. белков. Осадочная X. основана на различной растворимости осадков,
образуемых компонентам и смеси со спец. реактивами,
нанесёнными [нанесенными] на высокодисперсное вещество. В окислительно-восстановительной X.
разделение вещества обусловлено различными скоростями реакций,
протекающих между окислителем или восстановителем,
содержащихся в колонке,
и ионами анализируемого р-ра. При адсорбционно-комплексообразовательной X.
используют носитель,
способный удерживать как комплексообразующий агент,
так и продукты его реакции с катионами металла анализируемой смеси.
В аффинной Х. компоненты анализируемой смеси разделяются и зависимости от их биол.
специфичности к носителю. С учетом сред,
в к-рых проводят разделение,
различают газовую,
газово-жидкостную и жидкостную X.; по форме проведения процесса — колоночную,
бумажную и тонкослойную. Разновидность X.— гель-хроматография (гель-фильтрация),
при к-рой анализируемые смеси пропускают через сефадексы (производные декстрана).
Скорость прохождения веществ через них зависит от мол. м. вещества (первыми проходят вещества с большей мол.
м.). Разделение белков плазмы крови с помощью этого метода применяют в клинич.
практике. Лит.: Кармолиев Р. X.,
Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии,
М.,
1971.
|
