ОКРАСКА МИКРООРГАНИЗМОВ
, метод бактериол. исследования,
применяемый для обнаружения и изучения микробов при микроскопировании препаратов.
Последние могут быть приготовлены из культур микробов или нативного материала — тканей органов,
крови,
мокроты,
мочи,
фекалий,
гноя,
молока и других (см. Бактериологическое исследование
).
О. м.— сложный физико-химич. процесс,
при к-ром существенную роль играют рН среды,
адсорбция,
капиллярные явления,
электрич. заряд и химич. состав красителя и окрашиваемых объектов.
Эти факторы определяют взаимодействие отдельных структур микробной клетки с тем или иным красителем.
На результаты О. м. оказывают влияние физиол. состояние микробов,
способ приготовления препарата и метод окраски. Для О. м. применяют анилиновые красители,
большая часть к-рых— соли кислот или оснований,
поэтому эти красители,
в свою очередь,
подразделяются на основные и кислые. Для О. м. применяют гл. обр.
основные красители,
т. к. они быстрее фиксируются микробной клеткой. Кислые красители используют преим.
для окрашивания фона препарата в контрастный цвет. Существуют также нейтральные красители (краска Романовского — Гимзы).
В микробиол. практике наиболее употребительны анилиновые красители: красные — основной фуксин,
сафранин,
нейтральный красный,
Конго красный; синие — метиленовый синий,
толуидиновый синий,
опаловый синий; фиолетовые — метил фиолетовый,
кристаллич. фиолетовый,
генциан фиолетовый,
фиолетовый Гофмана; зелёный [зеленый] — малахитовый зелёный [зеленый],
бриллиантовый зелёный; [зеленый;] жёлто-коричневые [желто-коричневые] — везувин,
хризоидин. Из красителей готовят водные или спиртово-водные р-ры.
Для улучшения красящей способности нек-рых красителей к р-рам добавляют фенол,
едкий калий,
буру и др. Приготовление рабочих р-ров проводят по определённым [определенным] прописям.
Окраску производят как живых (витальная окраска),
так и убитых микробов,
фиксированных на предметном стекле. Для витальной О. м. готовят препараты раздавленной или висячей капли; краситель разводят в физиол.
р-ре хлорида натрия (1:10000—1:100000). Живые микроорганизмы окрашиваются плохо,
поэтому наиболее распространена окраска убитых микробов. О. м.
проводят простым и сложным методами. При простом методе применяют к.-л.
один краситель в рабочем р-ре,
к-рым окрашивают препарат в течение 1—2 мин; затем краску смывают дистил.
водой и высушивают препарат фильтровальной бумагой. Микробы окрашиваются в цвет используемого красителя.
При сложном методе используют 2 красителя (основной и дополнительный) и различные реактивы.
Этот метод позволяет отличить одну группу микробов от другой,
выявить отдельные элементы микробной клетки (споры) или химич.
вещества цитоплазмы (зёрна [зерна] волютина,
нуклеотиды). К сложным методам О. м. относят: окраску по Грану,
окраску кислотоустойчивых микробов (методы Циля — Нельсена и др.),
спор микробов (методы Ожешко,
Пешкова,
Мюллера и др.),
зёрен [зерен] волютина (методы Нейссера,
Мейера),
нуклеотидов (метод Фейльгена) и др. Во всех этих позитивных методах красители действуют непосредственно на микробную клетку.
Существуют и негативные методы О. м.,
основанные на окрашивания фона препарата,
на к-ром контрастно видны непрокрашенные микробы. Эти методы применяют в тех случаях,
когда изучаемые микроорганизмы (напр.,
спирохеты) или отдельные элементы микробной клетки (напр.,
капсула) плохо окрашиваются. В нек-рых случаях используют комбинированные методы О.
м.,
включающие позитивный и негативный способы окраски (метод Гинса для обнаружения капсул).
Широкое распространение получили флюоресцентные красители,
соединённые [соединенные] с сывороткой,
содержащей антитела против микроба определённого [определенного] вида,
благодаря чему при люминесцентной микроскопии происходит свечение этих микробных клеток.
См. также Микроскопия
.
Лит.: Розанов Н. И.,
Микробиологическая диагностика заболеваний с.-х. животных,
М.,
1952; Роуз Э.,
Химическая микробиология,
[пер. с англ.],
М.,
1971.
|
