ОПТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
, методы анализа веществ,
основанные на изучении их оптич. свойств. К О. м. и. относятся: фотометрич.
методы,
нефелометрия и турбидиметрия,
рефрактометрия
,
поляриметрия
,
спектральный и люминесцентный анализы.
К фотометрическим методам относят спектрофотометр ню и фотоколориметрию,
осн. на измерении поглощения света определяемым веществом в видимой,
ультрафиолетовой и инфракрасной областях спектра. Фотометрич.
(абсорбционные)
методы основаны па избирательном поглощении света исследуемым веществом и подчиняются закону Бугера — Ламберта — Бера (поглощение света пропорционально концентрации поглощающего вещества и толщине поглощающего слоя).
При фотометрич. методах анализ проводят по поглощению монохроматич.
света. Спектрофотометрия — один из наиболее точных фотометрич.
методов анализа,
применяемых в биохимии. Её [Ее] используют для количеств. определения (с большой точностью): белков,
нуклеиновых к-т,
витамина А,
НАД,
НАДФ,
17-оксикортикостероидов в моче и плазме крови; при изучении мн.
ферментов. В биохимич. исследованиях применяются спец. приборы — спектрофотометры типов СФ-4А,
СФ-16 и др. Фотоколориметрию используют при исследовании ферментов (кишечная щелочная фосфатаза,
альдолаза и трансаминазы сыворотки,
β-глюкуронидаза и др.),
глюкозы,
аминокислот,
белков,
фосфора,
железа и др. В биохимич. лабораториях чаще пользуются фотоэлектроколориметрами типа ФЭК-М и др.,
а также фотоэлектрич. фотометрами,
снабжёнными [снабженными] светофильтрами.
В основе нефелометрии и турбидиметрии лежит явление рассеяния или поглощения света твёрдыми [твердыми] или коллоидными частицами,
находящимися в р-ре. Нефелометрия основана на измерении интенсивности светового потока,
рассеянного твёрдыми [твердыми] частицами,
находящимися в р-ре; турбидиметрия — на измерении ослабления интенсивности светового потока,
прошедшего через р-р,
содержащий твёрдые [твердые] частицы (интенсивность уменьшается вследствие поглощения и рассеяния светового потока).
Нефеломегранализ осуществляют с помощью фотоэлектрич. колориметров-нефелометров типов ФЭК-Н-57,
ФЭК-56 и др. В качестве турбидиметров могут быть использованы колориметры.
Нефелометрич. методы используют для определения малых концентраций веществ в р-ре: ртути,
мышьяка,
сурьмы,
серы.
Спектральный анализ — качественный и количественный анализ состава вещества,
основан на исследовании его оптич. спектров. Различают атомный,
эмиссионный,
спектральный (по оптич. спектрам испускания атомов),
атомно-абсорбционный (по оптич. спектрам поглощения атомов) анализы.
Качеств. анализ производят по положению спектральных линий,
количественный — по их интенсивности. В вет. исследованиях для изучения содержания ионов металлов и солей в организме широко применяют спектрографы (ИСП-28,
ИСП-51 и др.),
регистрирующие спектры на фотоплёнке [фотопленке] и различающиеся разрешающей способностью,
а также атомные абсорбционные спектрофотометры (модель 207,
Япония) для определения концентрации Ca,
Cu,
Fe,
K,
Mg,
Na,
Pb,
Zn в жидкостях и тканях организма. В биохимич. исследованиях применяют и рентгеноспектральный анализ (по рентгеновским спектрам).
Люминесцентные методы анализа состава вещества основаны на люминесценции — свечении под воздействием облучения светом,
электронами,
в результате химич. реакций и т. д. В зависимости от длительности свечения различают флюоресценцию и фосфоресценцию.
Количеств. анализ осуществляют на основе зависимости интенсивности флюоресцентного излучения от концентрации вещества.
Флюоресцентное излучение,
измеряемое спец. приборами — флюорометрами ФМ-1 и электронным флюорометром ЭФ-ЗМ,
используют для количеств. определения витаминов B1,
B2,
фолиевой к-ты,
гетероауксина,
адреналина,
стероидных гормонов,
кодегидрогеназ,
триптофана,
антибиотиков (ауреомицинов),
жёлчных [желчных] к-т,
жиров,
порфиринов и др.,
а также нек-рых лекарств. веществ. Свежесть мяса и рыбы можно определить спец.
флюорометром. Флюоресцентные спектрофотометры (модель МПФ-2А и модель 203,
Хитати,
Япония) позволяют исследовать аминокислоты,
амины,
витамины,
стероиды,
пуриновые и пиримидиновые основания и др. метаболиты. Применяется также т.
н. сортовой люминесцентный анализ,
отделяющий внешне похожие разные объекты (напр.,
нормальные клетки от опухолевых).
Лит.: Ляликов Ю. С.,
Физико-химические методы анализа,
4 изд.,
М.— Л.,
1964; Кармолиев Р. X.,
Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии,
М.,
1971.
|