АГГЛЮТИНАЦИЯ
(от лат. agglutinatio — склеивание)
,
склеивание в глыбки (комочки) микробов,
эритроцитов или др. клеточных элементов и выпадение их в присутствии электролитов в осадок.
Различают А. специфическую,
в основе к-рой лежит взаимодействие антигена с гомологичным антителом
,
содержащимся в организме животного,
к-рому был введён [введен] данный антиген (иммуноагглютинация); неспецифическую (химическую),
возникающую от изменения рН среды,
концентрации электролитов; спонтанную,
к-рую наблюдают при суспендировании бактерий (находящихся в R-форме) в физиол.
р-ре и при нагревании,
что связано с изменением коллоидного состояния бактериальной клетки.
Антиген,
участвующий в А.,
наз. агглютиногеном,
антитело — агглютинином,
образующийся осадок — агглютинатом. При образовании агглютината имеет значение количественное соотношение антигена и антител (феномен оптимума).
При избытке или недостатке антител происходит задержка А.
Реакция А. (РА) строго специфична. Агглютинины присоединяются только к тем агглютиногенам,
против к-рых они получены. Это свойство РА используют в вет. практике для диагностики ряда инфекц.
болезней в двух вариантах: по заведомо известному антигену определяют наличие антител в сыворотке больного или ранее переболевшего животного или по известной сыворотке,
содержащей антитела к определяемому микроорганизму,
устанавливают его вид или серологич. тип. В связи с тем,
что и на поверхности микробной клетки расположено большое кол-во детерминантных групп,
у нек-рых видов микробов эти группы могут иметь сходное строение.
При введении таких антигенов в сыворотке животного образуются антитела на специфич.
антигены и на сходные с ними. Полученная сыворотка будет агглютинировать не только “свой” антиген,
но и др. (групповая А.). Для освобождения сыворотки от групповой А.
применяют реакцию адсорбции агглютининов (Кастеллани реакцию
),
а также разводят сыворотки (специфич. антитела агглютинируют в больших раз-ведениях,
групповые — в меньших). А. может быть осуществлена с растворимыми антигенами и вирусами.
Для этого их адсорбируют на различных субстратах,
чаще всего на эритроцитах различных животных. Такие сенсибилизированные эритроциты агглютинируются под воздействием иммунных сывороток (реакция непрямой,
или пассивной,
А.). Эта РА широко применяется для обнаружения антител,
диагностики вирусных болезней и выявления антигенных различий нек-рых вирусов.
Активность сыворотки,
участвующей в РА,
определяется её [ее] титром,
т. е. наибольшим разведением,
при к-ром отчётливо [отчетливо] выявляется феномен А. Необходимо отличать диагностич.
титр от нормального,
к-рый бывает при наличии групповых антител,
или антител,
образовавшихся после ранее перенесённой [перенесенной] болезни. Он обычно бывает в 2—4 раза ниже диагностического.
В зависимости от степени проявления А. может быть учтена макроскопически,
если она видна невооружённым [невооруженным] глазом,
и микроскопически,
когда агглютинат виден при среднем увеличении микроскопа,
Макроскопич. А. выполняют,
пользуясь серологич. пробирками (пробирочная,
развёрнутая [развернутая],
объёмная [объемная] РА),
в к-рые вносят последовательные разведения сыворотки,
приготовленные на карболизированном 0,5%-ном р-ре хлорида натрия.
Реакцию ставят в объёме [объеме] 1 мл. После добавления стандартного антигена пробирки встряхивают и выдерживают при t 37°C от 2—4 до 16—18 ч (в зависимости от вида возбудителя),
а затем при комнатной темп-ре 18—24 ч. Контролем являются заведомо положительная сыворотка с антигеном,
нормальная сыворотка с антигеном и антиген с физиол. р-ром. Положительная сыворотка должна вызвать хорошо выраженную РА,
а антиген в нормальной сыворотке и в физнол. р-ре не должен давать спонтанной А.
РА учитывают по степени просветления жидкости и характеру образования осадка и оценивают в крестах: полное просветление жидкости и образование агглютината на дне пробирки в виде зонтика оценивают ++++,
при встряхивании зонтик разбивается на хлопья; при РА+++ жидкость слегка опалесцирует,
при ++ жидкость мутноватая,
осадок незначительный; при отрицательной РА жидкость мутная,
осадка нет или он собирается в виде пуговки на дне и разбивается в равномерную муть.
Положительной считается А. на 4,
3 и 2 креста в определённых [определенных] разведениях. При нек-рых болезнях (напр.,
колибактериоз),
когда агглютинат очень мелкий,
реакцию учитывают,
пользуясь лупой или агглютиноскопом. Макроскопич. А. можно выполнить и на предметном стекле (пластинчатая,
капельная РА). Для этого наносят каплю сыворотки и каплю физиол.
р-ра и в них суспендируют при помешивании испытуемый антиген.
При положительной А. через 1—3 мин капля становится прозрачной и в ней отчётливо [отчетливо] видны агглютинаты.
При этом варианте РА испытуемыми могут быть как сыворотка,
так и антиген,
но чаще всего этот вариант используют для идентификации микроорганизмов.
Микроскопич. А. применяют для быстрого ориентировочного исследования при незначительном кол-ве антигена или слабой активности сыворотки.
Для повышения контрастности изображения применяют люминесцентный вариант микроагглютинации: антиген суспендируют в капле люмине-сцирующей или агглютинирующей сыворотки с добавлением флюоресцентных красителей.
Учёт [Учет] этой А. производят при среднем увеличении микроскопа.
Лит.: Бойд У. К.,
Основы иммунологии,
пер. с англ.,
М.,
1969; Тимаков В.Д.,
Микробиология,
М.,
1973.
|
